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水中葉綠素a的測(cè)定方法

發(fā)布時(shí)間:2023-06-12 19:03:00   訪客:643

葉綠素是植物光合作用中的重要光合色素,通過(guò)測(cè)定浮游植物葉綠素,可掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力情況。浮游藻類里常見(jiàn)的葉綠素有a、b、c、d四種類型,其中,葉綠素a在一切浮游藻類里大約占有機(jī)物干質(zhì)量的1%~2%,是環(huán)境監(jiān)測(cè)中表征浮游植物生物量最常用的指標(biāo)之一,所以常被用于研究地表水環(huán)境的富營(yíng)養(yǎng)化。那水中葉綠素a含量一般是多少呢?水體富營(yíng)養(yǎng)化一般采用的指標(biāo)是:氮含量超過(guò)0.0.3 mg/L,磷含量大于0.01~0.02mg/L,BOD大于10mg/L,pH值7~9的淡水中細(xì)菌總數(shù)超過(guò)10萬(wàn)個(gè)/毫升,葉綠素a含量大于10ug/L。

水質(zhì)葉綠素a的測(cè)定方法有分光光度法、熒光光譜法、色譜法和遙感監(jiān)測(cè)等方法,其中,分光光度法和熒光光譜法應(yīng)用最為廣泛。下面小編來(lái)具體介紹一下。

1、分光光度法

分光光度法屬于光度法的一種,該分析方法采用的原理是物質(zhì)分子對(duì)光具有選擇吸收的特性。葉綠素a的最大吸收峰位于663nm,在一定濃度范圍內(nèi),其吸光度與濃度符合朗伯-比爾定律,可根據(jù)吸光度-濃度之間的線性關(guān)系,計(jì)算葉綠素a的濃度。

2、熒光光譜法

葉綠素分子被紫外光照射后可發(fā)射出特征紅色熒光,其熒光強(qiáng)度與葉綠素濃度呈正比,據(jù)此可釆用熒光法進(jìn)行葉綠素a的定量分析。普通萃取熒光法的操作步驟主要為標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定和樣品熒光強(qiáng)度的測(cè)定。將提取的新鮮綠色植物液中的葉綠素作為儲(chǔ)備液,用分光光度法標(biāo)定其濃度:將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋配制成標(biāo)準(zhǔn)系列,用熒光光度計(jì)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的熒光強(qiáng)度,繪制葉綠素a標(biāo)準(zhǔn)曲線;由樣品測(cè)得的熒光強(qiáng)度從葉綠素a標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)濃度。

3、色譜法

高效液相色譜(HPLC)法是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、醫(yī)藥、生命科學(xué)等領(lǐng)域的分析手段。使用高效液相色譜法測(cè)定葉綠素a時(shí),需要破壞測(cè)定藻類的原樣,前處理方法與分光光度法的前處理方法相似。

4、遙感監(jiān)測(cè)

水質(zhì)遙感監(jiān)測(cè)是通過(guò)監(jiān)測(cè)一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的水體輻射值,定量分析水體反射光譜特征與水質(zhì)指標(biāo)間的關(guān)系,進(jìn)而構(gòu)建水質(zhì)指標(biāo)反演算法的一類方法體系。遙感技術(shù)測(cè)定葉綠素a近年來(lái)已經(jīng)被國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者證實(shí)具有監(jiān)測(cè)范圍廣、速度快、成本低和便于進(jìn)行長(zhǎng)期動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的優(yōu)勢(shì)。


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