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四種葉綠素測(cè)定方法簡(jiǎn)析

發(fā)布時(shí)間:2022-07-26 17:15:41   訪(fǎng)客:1933

葉綠素含量是植物生長(zhǎng)環(huán)節(jié)中的重要生理指標(biāo)。由于它對(duì)周?chē)h(huán)境非常敏感,與植物的光合作用和養(yǎng)分吸收密切相關(guān),因此被廣泛用作植物生長(zhǎng)的常規(guī)測(cè)量指標(biāo)項(xiàng)目。葉綠素含量的測(cè)定方法有很多,國(guó)際上普遍采用傳統(tǒng)的Arnon法(又稱(chēng)研磨法)。但這種方法需要將植物材料研磨后進(jìn)行轉(zhuǎn)移、過(guò)濾或離心處理,不僅工作量大,而且不可避免地使檢測(cè)人員長(zhǎng)時(shí)間接觸空氣中揮發(fā)的試劑,對(duì)人體危害較大。近年來(lái),直接浸取法受到重視,用不同比例的混合液提取葉綠素,證明了混合液提取的可行性,對(duì)傳統(tǒng)的Arnon法進(jìn)行了改進(jìn),將樣品冷凍處理后,用50℃丙酮靜置萃取計(jì)量,大大提高了工作效率。

(1)研磨法:稱(chēng)取0.5g試樣于研缽中,加入少量CaCO3和5mL 80%丙酮,充分研磨至白色(約5min),轉(zhuǎn)移至10mL帶塞離心管中,定容至刻度,搖勻后置于4℃冰箱中12 h,離心10 min(2000 r/min),取上清液測(cè)定。

(2)直接浸取法:稱(chēng)取試樣0.5g于10mL帶塞離心管中,用80%丙酮定容至刻度,于暗柜中靜置72h浸取,取上清液測(cè)定。

(3)樣品冷凍后50℃提取液提煉法:稱(chēng)取0.5g樣品于10mL帶塞離心管中,放入冰箱冷凍2小時(shí),取出后加入10mL在水浴鍋中加熱至50℃的80%丙酮。充分搖勻后,在暗柜中靜置4h,取上清液測(cè)定。

(4) 葉綠素檢測(cè)儀:葉綠素檢測(cè)儀是所有方法中zui快的。您只需手持葉綠素檢測(cè)儀,將葉片插入儀器的感應(yīng)部位,然后關(guān)閉測(cè)量探頭即可。用于此測(cè)量的儀器也稱(chēng)為便攜式葉綠素檢測(cè)儀,因?yàn)槿~綠素檢測(cè)儀機(jī)身小巧,可以輕松攜帶到野外進(jìn)行測(cè)量。

在上述測(cè)定方法中,直接浸取法提取效果zui好,但耗時(shí)較長(zhǎng),傳統(tǒng)研磨法葉綠素的損失較大,冷凍后用50℃提取液提煉法操作簡(jiǎn)便且提煉速度較快,在提煉率和穩(wěn)定性方面均顯示良好的優(yōu)越性。冷凍后用50℃提取液提煉法的比較好的試驗(yàn)條件為將試驗(yàn)材料冷凍1h后,靜置提煉3h。與其他三種化學(xué)方法相比,葉綠素檢測(cè)儀更快、更方便。而且,用葉綠素檢測(cè)儀測(cè)量葉綠素含量時(shí),不會(huì)對(duì)葉片造成傷害,這也是使用葉綠素檢測(cè)儀的另一大優(yōu)勢(shì)。因?yàn)椴恍枰~,可以直接用儀器夾住葉子進(jìn)行測(cè)量,這樣就可以在作物生長(zhǎng)的全過(guò)程中對(duì)具體的葉子進(jìn)行監(jiān)測(cè),進(jìn)而獲得更科學(xué)的分析結(jié)果。


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