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便攜式微生物檢測(cè)儀是如何培養(yǎng)微生物的

發(fā)布時(shí)間:2022-05-06 09:12:37   訪客:453

不同種類(lèi)微生物的培養(yǎng)需要使用不同的培養(yǎng)基。同時(shí)一種微生物也可以通過(guò)多種的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。這樣主要介紹使用微生物檢測(cè)儀的各種不同培養(yǎng)方法。

1.濾膜法

濾膜是一種微孔性薄膜。將水樣注入已滅菌的放有濾膜(孔徑0.45μm)的抽濾裝置中,經(jīng)過(guò)抽濾,細(xì)菌會(huì)被截留在膜上,然后將濾膜貼于相應(yīng)細(xì)菌的培養(yǎng)基上,進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后,濾膜上會(huì)根據(jù)不同的培養(yǎng)基,出現(xiàn)各種不同的菌落。計(jì)算濾膜上生長(zhǎng)的菌落數(shù),可計(jì)算出每1L水中含有的各種細(xì)菌的菌群數(shù)。濾膜法具有高度的再現(xiàn)性,可用于檢驗(yàn)各種水樣,能比多管發(fā)酵法更快的獲得肯定的結(jié)果。

1.1濾裝置

抽濾裝置包括電池、真空泵、斗式過(guò) 濾杯、中間砂心過(guò)濾頭(燒結(jié)濾頭)、三角集液瓶以及不銹鋼制固定夾。以無(wú)菌操作,依照右圖把裝置安裝起來(lái)。

1.2水樣過(guò)濾

用無(wú)菌鑷子(火焰滅菌器滅菌)夾取滅菌濾膜邊緣,貼在已滅菌的燒結(jié)濾頭(火焰滅菌器滅菌)上,夾好抽過(guò)濾杯。將適量的水樣注入過(guò)濾杯中,加蓋,開(kāi)支真空泵,把水中的所有細(xì)菌抽濾在濾膜的表面。

1.3細(xì)菌培養(yǎng)

將濾膜移到培養(yǎng)皿里已被相應(yīng)培養(yǎng)基浸潤(rùn)的吸收墊上,在移動(dòng)培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。

1.4結(jié)果觀察與報(bào)告

計(jì)算濾膜上生長(zhǎng)的菌群菌落個(gè)數(shù),根據(jù)過(guò)濾水樣的量,計(jì)算1L或100ml水樣中菌群數(shù)。

2.酶底物法

酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸菌群及大腸埃希氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法,酶底物法是目前水中總大腸菌群及大腸埃希氏菌檢測(cè)的最先進(jìn)方法。以其方便快捷,假陽(yáng)性低,適用大量樣品快速檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)正逐步被國(guó)內(nèi)檢測(cè)部門(mén)所認(rèn)可。相對(duì)于多管發(fā)酵和濾膜法,酶底物法檢測(cè)步驟大大減少,而且對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高,檢測(cè)時(shí)間可減少到24小時(shí),在日常水樣監(jiān)測(cè)及應(yīng)急監(jiān)測(cè)中具有很好的應(yīng)用前景,可及時(shí)檢測(cè),預(yù)防,最大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。

2.1操作步驟:

用 100 mL的無(wú)菌稀釋瓶量取 100 mL 水樣,加入一管酶底物法培養(yǎng)基粉末,混搖均勻使之完全溶解。準(zhǔn)備 10 支10ml適當(dāng)大小的滅菌試管,用無(wú)菌吸管分別從上述稀釋瓶中吸取10mL水樣至各試管中,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。

2.2結(jié)果觀察與報(bào)告:

大腸菌群:將培養(yǎng) 24 h之后的試管取出觀察,如果試管內(nèi)水樣變成黃色則表示該試管含有總大腸菌群。計(jì)算有黃色反應(yīng)的試管數(shù),對(duì)照下表1查出其代表的總大腸菌群最可能數(shù)CMPN)。 結(jié)果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未產(chǎn)生黃色,則可報(bào)告為總大腸菌群未檢出。

大腸埃希氏菌:將培養(yǎng)24h顏色變成黃色的水樣的試管,在暗處用紫外燈觀察,如果有藍(lán)色熒光產(chǎn)生則表示有大腸埃希氏菌。計(jì)算有熒光反應(yīng)的試管數(shù),對(duì)照表1 查出其代表的大腸埃希氏菌最可能數(shù)MPN), 結(jié)果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未產(chǎn)生藍(lán)色熒光,則可報(bào)告為大腸埃希氏菌未檢出。


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